作者：刘雨欣，陈思，高阳，顾德媛，彭海涛，张东，张如，许会会，刘亚乔，杨艳玲^*

刊物名称：畜牧兽医学报

发表年月：2025年3月21日

摘要内容：

旨在提取羊布鲁菌生物3型外膜囊泡(outer membrane vesicles, OMVs)并分析其蛋白组成成分，制 备 OMVs 亚单位疫苗，评价 OMVs 疫苗的免疫原性。本研究利用差速离心法提取了 OMVs，通过 SDSPAGE、透射电镜和 ZeTA 纳米粒径对 OMVs 进行鉴定；利用 Label free 液相质谱技术鉴定 OMVs 蛋白质组 成成分，并进行 GO 聚类分析和 KEGG 富集分析；OMVs 亚单位疫苗免疫小鼠后，对小鼠脾脏进行病理检 测和 T 细胞亚群分类检测；对小鼠血清进行 IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A 炎性细胞因 子水平检测和 IgG 1、IgG 2a 和 IgG 2b 免疫球蛋白含量检测，评价 OMVs 免疫后小鼠的病理变化和细胞免 疫水平。结果显示：成功提取了 OMVs，其粒径大小为 20～200 nm，分子量在 10～130 ku 之间。蛋白质 组学鉴定结果显示， OMVs 中含有 1612 种蛋白质，其中包括 Omp2b、Omp25、 Omp31 、Omp19 和 Bp26 等多种外膜蛋白，以及脂蛋白和 ABC 转运体相关蛋白质。OMVs 亚单位疫苗免疫小鼠后，小鼠脾脏未见 明显的淋巴细胞排列疏松及坏死；诱导小鼠产生高水平 IgG 免疫球蛋白含量；同时诱导小鼠血清中 IFN-γ、 IL-2、IL-6、IL-17a 和 TNF-α 炎性细胞因子表达量上升，IL-10 和 IL-4 炎性细胞因子表达量下降；CD4 + / CD8 +T 细胞比值增加。本研究证明 OMVs 中含有多个有效的免疫原性抗原，能诱导小鼠产生较好的细胞免 疫水平，为明确布鲁菌 OMVs 蛋白成分和布鲁菌亚单位疫苗研发奠定了理论基础。

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原文链接：https://link.cnki.net/urlid/11.1985.s.20250321.0918.002