作者：刘佳佳，符建海，孙亚杰，许丽文，李双双，白雪，胡博

刊物名称：畜牧与兽医

发表年月：January 2026

摘要内容：为制备猫冠状病毒（FCoV）核衣壳蛋白（N）的单克隆抗体，本研究利用生物信息学预测工具对FCoVN蛋白序列进行分析，并通过原核表达制备N蛋白，将蛋白纯化处理后对BALB/c小鼠实施免疫，采用细胞融合手段获得杂交瘤细胞，并经过多轮亚克隆筛选流程成功制备单克隆抗体。通过效价测定、亚型鉴定及特异性分析等方式对该抗体进行系统性检测评估。生物信息学分析显示，N蛋白由377个氨基酸组成，理化特性分析表明其为亲水性不稳定蛋白，二级结构组成中α－螺旋占10.61%、β－转角占14.85%、无规则卷曲达74.54%；结构特征分析表明该蛋白既无典型信号肽序列，也不含跨膜结构域，但存在多个具有潜在免疫原性的B淋巴细胞表位区域。基于此，制备并获得了分子量约为67 kDa的FCoV N 蛋白，并成功筛选出1株单克隆抗体的杂交瘤细胞株（3A5），测定抗体效价为1∶256000，抗体亚型为IgG1型，Westernblot及间接免疫荧光试验结果显示其能够与FCoVN蛋白和FCoV发生免疫反应。本研究结果为FCoV免疫学诊断、抗体药物研制提供了有力支撑。

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原文链接：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract？v=9oxawJFDgQWD2DqaxTcp8Y2ZRk8Umlbg8poA7mdVnRfGxhYs3nZZ9haezVr8z32g_J6M8fm1eBgP0aWOzk6kBQ71ujLxmhBZcfj59Nhi0oJTEbvPaGCuOcHVZt_eHzySP7s5UBZQPm9Vi4BD47Xj8TJMpGnhaKDomxoZph_BHbM=&uniplatform=NZKPT